Що таке діагностика ПЛР та як її проводять

Що таке діагностика ПЛР та як її проводять

Полімеразна ланцюгова реакція (скорочено ПЛР) – сучасний та надточний метод діагностики на генетичному та молекулярному рівні. ПЛР-діагностика дає можливість визначити у людини наявність інфекції чи спадкової хвороби.

Аналіз ПЛР

Сутність способу у тому, що ДНК чи РНК узятого вивчення матеріалу піддається багаторазовому примноженню (ампліфікації), що можливо за наявності ферментів. Завдяки цьому отримують велику масу ДНК або РНК, через яку роблять візуальну оцінку. Спеціалісти мають базу відомостей про будову всіх хвороботворних збудників і відповідно до неї дають оцінку, який мікроорганізм отримали.

Досліджуваний матеріал (слина, кров, мокрота, ін.) поміщають усередину спеціального приладу (ампліфікатор) та додають певні ферменти. Вони поєднуються з досліджуваними ДНК чи РНК і викликають синтез їх копій. За допомогою ПЛР (плр тест на дому — за посиланням) можна визначити тип збудника, його кількість.

Цікаво! Метод ПЛР був винайдений 1983 року американським ученим Керрі Мюллісом. За це відкриття йому було вручено Нобелівську премію з хімії.

Плюси і мінуси

Методика ПЛР стала застосовуватися у сфері медицини з недавнього часу та зайняла важливе місце у діагностичному процесі.

Переваги методу:

  1. Пряме визначення збудника. Деякі методи, наприклад, імуноферментний аналіз, дає можливість виявити білки, що виділяються мікробами. Це непряме визначення присутності збудників. А за допомогою ПЛР з високою точністю виявляється шматочок ДНК, який належить до певної інфекції.
  2. Специфіка методики. Оскільки ПЛР виявляє ДНК, що належить збуднику, отримати хибне висновок практично неможливо (за винятком невідомого збудника). А при імунологічному методі може статися помилка через перехресну реакцію між антигенами.
  3. Велика чутливість. Спосіб визначає наявність навіть дуже малої кількості бактерій або вірусів в організмі. Достатньо 10 хвороботворних клітин на одну пробу. Для інших методів мінімальна кількість клітин має бути не менше ніж 105.
  4. Універсальність методики. Процес дослідження щодо різних мікроорганізмів схожий через подібність всіх ДНК, РНК. На підставі цього в одній пробі можна виявити кілька збудників.
  5. Швидке одержання висновку. Від моменту забору проби до отримання результату проходить трохи більше 4-5 годин. При ПЛР не потрібно посів культури, тому метод досить швидкий.
  6. Ефективність діагностування при прихованих видах інфекцій. Метод виявляє ті мікроорганізми, які важко чи зовсім не піддаються культивуванню. Такі збудники зустрічаються при прихованих формах захворювання.
  7. Широка сфера використання. ПЛР може бути використана не тільки з метою діагностики хвороб людини, але і для визначення мікроорганізмів у ґрунті, продуктах, воді та ін.